Кукольный музей города Харькова является старейшим в Украине. По богатству экспозиционных материалов, представленных в стенах музея, он уступает только Музею кукол, созданному при Гoсударственном тeатре кукoл в Москве. Но нужно учитывать тот факт, что во всем мире существует менее двух десятков подобных музеев, поэтому сложно переоценить историческую значимость этого заведения.
Впервые идея открытия на Украине музея театральных кукол появилась еще в 1952 году. Тогда Театр получил помещение, расположенное по адресу ул. Красина, дом 3. Позже, в 1954 году здесь был открыт музей. А свою жизнь он начал как небольшая выставка кукол, участвовавших в спектаклях, которые демонстрировались на сцене театра.
В конце 60-х годов Харьковский кукольный театр получил помещение, в котором располагается и сегодня. Здание было построено еще в 1907 году, и раньше в нем находился банк. Проект здания был создан академиком А. Бекетовым. Перед открытием театра кукол оно было реконструировано. Под музей был приспособлен весь третий этаж здания, где оборудовали три выставочных зала.
Впервые свои двери музей открыл 23 августа 1968 года. После открытия музея в течение нескольких лет удалось собрать крупнейшую коллекцию выставочных экспонатов. Своему расцвету экспозиция музея должна быть обязана Мeждунарoднoй oрганизации дeятелей тeатра кукoл, ведущую должность в которой занимал Афанасьев Виктор Андреевич. Он также являлся художественным руководителем кукольного театра в Харькове. Экспонаты для Музея театральных кукол поступали не только из союзных республик, но и из Болгарии, Польши, Канады, США, ГДР, Франции и Бельгии. Сегодня в музее хранится более 11 000 выставочных экспонатов. Все они хранят в себе историю искусства. Есть здесь и сами куклы и одежда для кукол, и фотографии спектаклей, и театральные программы со всех концов света.
Ценнейшими экспонатами музея являются творения первых советских мастеров — кукольников – Симонович-Ефимовых, Е. Беклешовой, С. Образцова и многих других. А куклы знаменитого Мишеля Мешке, который своим спектаклем «Король Убю» кардинально изменил все представления о театре кукол, стали украшением коллекции музея.
В 21 веке Музей театральных кукол пережил глобальные перемены. В 2002 году была произведена замена экспозиционного оборудования. В 2005 году начались масштабные реэкспозиционные работы. По современным меркам музей стал более зрелищным.